Die für die Jesuiten erbaute Kirche besitzt eine freskenbemalte Decke von Johann Lukas Kracker, die sich über 1500 Quadratmeter erstreckt – ein einziges, zusammenhängendes Gemälde, das das Leben des heiligen Nikolaus darstellt und das größte seiner Art in Mitteleuropa bleibt. Als Kaiser Joseph II. den Jesuitenorden 1773 auflöste, ging das Gebäude an die Benediktiner, dann an die orthodoxe Kirche und schließlich 1920 an die Tschechoslowakische Hussitische Kirche über. Ihr Chor diente bis 1989 als Beobachtungsposten der Staatssicherheit während des Kalten Krieges.
Heute fungiert die Kirche sowohl als aktive Pfarrei als auch als Konzertsaal. Ihre 2500-Pfeifen-Orgel, 1745 von Tomáš Schwarz erbaut, zieht Musiker der Tschechischen Philharmonie sowie gastierende Kammerorchester an. Die barocke Intonierung des Instruments – konzipiert für die Akustik von Stuck und Marmor statt für moderne Dämmstoffe – erzeugt das resonante Sustain, das dazu führt, dass die Konzertprogramme in der St.-Nikolaus-Kirche in Prag Bach, Händel sowie die tschechischen Komponisten Zelenka und Mysliveček bevorzugen. Konzerttouren für die St.-Nikolaus-Kirche in Prag beinhalten regelmäßig Vorträge vor der Aufführung über die Rolle des Gebäudes in der liturgischen Musik des 18. Jahrhunderts, als die Jesuiten Werke speziell für diese akustische Umgebung in Auftrag gaben.
Die räumliche Logik des Gebäudes spiegelt die Theologie der Gegenreformation wider: Das ovale Kirchenschiff komprimiert die Seitenkapellen, um den Blick auf die gedrehten Säulen des Hochaltars und die darüber thronende Apotheose des heiligen Nikolaus von Kracker zu lenken. Statuen von Ignác Platzer dem Älteren schmücken die Gesimse – Engel, Kirchenväter, allegorische Tugenden –, alle aus Slivenec-Kalkstein gemeißelt, der acht Kilometer südlich abgebaut wurde. Die Laterne der Kuppel lässt Nordlicht ein, das sich während der Abendkonzerte über die Fresken bewegt und die wahrgenommene Farbtemperatur von Krackers Blau- und Goldtönen verändert. Die klassischen Konzerte in der St.-Nikolaus-Kirche in Prag nutzen dieses Zusammenspiel, indem sie die Startzeiten auf die „Goldene Stunde“ legen, wenn schräges Sonnenlicht das westliche Rosenfenster entflammt.
Das Orgelkonzertprogramm der St.-Nikolaus-Kirche in Prag erreicht seinen Höhepunkt während der Adventszeit, wenn sich der ursprüngliche liturgische Kalender des Gebäudes mit der touristischen Nachfrage nach Weihnachtskonzerten in der St.-Nikolaus-Kirche in Prag deckt. Die Akustik begünstigt kleine Ensembles – Streichquartette, Blechbläserquintette, Solo-Orgel – gegenüber großen Orchestern, da die 21 Meter breite Breite des Kirchenschiffs ausgeprägte frühe Reflexionen erzeugt, die schnelle Passagen verschwimmen lassen, wenn mehr als fünfzehn Musiker gleichzeitig spielen. Diese akustische Signatur, die durch minimale moderne Eingriffe bewahrt wurde, macht den Veranstaltungsort zu einem lebendigen Labor für historische Aufführungspraxis und zu einem Fallbeispiel dafür, wie architektonische Förderung den barocken Musikkanon prägte, zu dem Konzerttickets für die St.-Nikolaus-Kirche in Prag jeden Abend Zugang gewähren.
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